Escudo de la República de Colombia
Sistema Nacional de Biliotecas - Repositorio Institucional Universidad Nacional de Colombia Biblioteca Digital - Repositorio Institucional UN Sistema Nacional de Bibliotecas UN

Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus vih-1

Wilches Arciniegas, Carolina and Cordero Camacho, Claudia Patricia and Aristizabal Gutierrez, Fabio Ancizar (2005) Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus vih-1. Revista Colombiana de Ciencias Químico Farmacéuticas; Vol. 34, núm. 1 (2005) 0034-7418 1909-6356 .

Texto completo

[img]
Vista previa
PDF
546kB

URL oficial: http://revistas.unal.edu.co/index.php/rccquifa/art...

Resumen

Se implementó una prueba de tamizaje preliminar para evaluar la potencial inhibición ejercida por productos de origen natural y sintético sobre la actividad de la proteína Transcriptasa Reversa del virus VIH-1, en respuesta a la necesidad de disponer de un ensayo in vitro no radioactivo, relativamente rápido, que arroje resultados válidos, con costos moderados, bioseguro y de fácil acceso. Esta prueba se basa en la capacidad que tiene la proteína transcriptasa reversa viral para formar DNA de cadena sencilla (cDNA) a partir de RNA, utilizando deoxinucleótidos trifosfatados (dNTPs), proceso conocido como transcripción reversa. Para detectar la actividad de la proteína se realizaron ensayos fluorométricos in vitro, usando proteína recombinante sin purificar, y nucleótidos fluorescentemente marcados (Cy3-dCTP) como parte del sustrato. Las condiciones establecidas para la actividad de la proteína fueron 5µg/reacción de RNA total y 2µg/reacción de oligo-dT12-18, reflejadas en 43.6% de incorporación del nucleótido fluoromarcado, A preliminary screening test to asses the potential of natural and synthetic products to inhibit the HIV-1 reverse transcriptase activity was implemented. This method is a response to the need of an in vitro, non radioactive, easy, biosafety and rapid test, with reliable results and accesible to our laboratories. This test is based on the ability of the viral reverse trascriptase (RT) of synthesize single strand DNA (cDNA) from a RNA strand, using triphosphate deoxynucleotides (dNTPs), process known as reverse transcription. In order to detect the enzyme activity in vitro fluorometric assays were carried out, with unpurified recombinant protein and fluorescently marked nucleotides as part of the substrate (Cy3-dCTP). Conditions for the protein activity were established at 5µg/reaction of total RNA and 2µg/reaction of oligo-dT12-18, which gave a 43.6% of incorporation of fluorescent nucleotide (Cy3-dCTP).

Tipo de documento:Artículo - Article
Información adicional:Departamento de Farmacia-Facultad de Ciencias Universidad Nacional de Colombia Se autoriza la fotocopia de articulos y textos para fines de uso académico o interno de las instituciones citando la fuente. Las ideas emitidas por los autores son reponsabilidad expresa de estos y no de la revista.
Palabras clave:HIV-1 - Reverse Transcriptase - AIDS - cDNA - Retrotranscription, Cy3., VIH-1 - Transcriptasa reversa - SIDA - cDNA - Retrotranscripción, Cy3
Unidad administrativa:Revistas electrónicas UN > Revista Colombiana de Ciencias Químico Farmacéuticas
Código ID:13926
Enviado por : Dirección Nacional de Bibliotecas STECNICO
Enviado el día :24 Junio 2014 11:08
Ultima modificación:31 Enero 2018 19:08
Ultima modificación:31 Enero 2018 19:08
Exportar:Clic aquí
Estadísticas:Clic aquí
Compartir:

Solamente administradores del repositorio: página de control del ítem

Vicerrectoría de Investigación: Número uno en investigación
Indexado por:
Indexado por Scholar Google WorldCat DRIVER Metabiblioteca OAIster BASE BDCOL Registry of Open Access Repositories SNAAC Red de repositorios latinoamericanos eprints Open archives La referencia Tesis latinoamericanas OpenDOAR CLACSO
Este sitio web se ve mejor en Firefox