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Purificación de lipopolisacárido de porphyromonas gingivalis libre de polisacáridos utilizando cromatografía de alta resolución sephacryl s-200

Gualtero, Diego and Castellanos, Jaime and Perez, Gerardo and Lafaurie, Gloria (2010) Purificación de lipopolisacárido de porphyromonas gingivalis libre de polisacáridos utilizando cromatografía de alta resolución sephacryl s-200. Acta Biológica Colombiana; Vol. 13, núm. 3 (2008); 148-160 Acta Biológica Colombiana; Vol. 13, núm. 3 (2008); 148-160 1900-1649 0120-548X .

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URL oficial: http://revistas.unal.edu.co/index.php/actabiol/art...

Resumen

El objetivo de este trabajo fue mejorar un método estándar para la purificación de lipopolisacárido (LPS) de Porphyromonas gingivalis libre de polisacáridos usando una estrategia de extracción, digestión enzimática y cromatografía de alta resolución. La bacteria P. gingivalis se cultivó en condiciones de anaerobiosis y se hizo extracción de las membranas con el método de fenol-agua. Luego de una digestión enzimática (DNAsa, RNAsa y proteasa) se separó el extracto por filtración por gel con Sephacryl S-200. La muestra purificada se caracterizó por electroforesis en gel de acrilamida con tinción de plata y por el método Purpald se detecto el ácido 2-ceto-3-desoxioctulosónico (KDO). Se obtuvo una preparación libre de ácidos nucleicos, proteínas y polisacáridos. La separación por cromatografía fue de alta resolución al permitir la obtención de dos picos con diferentes componentes. El protocolo de purificación nos permitió obtener LPS de P. gingivalis con alto grado de pureza, el cual podría ser usado en próximos ensayos para evaluar su función en ensayos in vitro e in vivo; así como iniciar la obtención de LPS de otras bacterias períodontopáticas, con el fin de investigar la asociación de enfermedad períodontal con enfermedades cardiovasculares.

Tipo de documento:Artículo - Article
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Palabras clave:períodontitis; lipopolisacáridos, endotoxinas; cromatografía.
Unidad administrativa:Revistas electrónicas UN > Acta Biológica Colombiana
Código ID:21170
Enviado por : Dirección Nacional de Bibliotecas STECNICO
Enviado el día :27 Junio 2014 11:39
Ultima modificación:18 Agosto 2014 15:27
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