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Evaluación de dos métodos de extracción de adn a partir de biopsias fijadas en formalina y embebidas en parafina en condiciones no optimas

Bustamante, Javier Andres and Astudillo, Miryam and Pazos Moncayo, Alvaro Jairo and Bravo, Luis Eduardo (2011) Evaluación de dos métodos de extracción de adn a partir de biopsias fijadas en formalina y embebidas en parafina en condiciones no optimas. Acta Biológica Colombiana; Vol. 16, núm. 2 (2011); 83-98 Acta Biológica Colombiana; Vol. 16, núm. 2 (2011); 83-98 1900-1649 0120-548X .

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URL oficial: http://revistas.unal.edu.co/index.php/actabiol/art...

Resumen

Los tejidos de archivo son un material de incalculable valor para estudios retrospectivos que requieran la aplicación de análisis moleculares. Existen múltiples métodos de extracción de ADN a partir de este tipo de muestras. No obstante, la mayoría de métodos toman mucho tiempo y los reactivos empleados contribuyen a la fragmentación del ADN. Con el objetivo de optimizar dos métodos de extracción de ADN a partir de tejidos embebidos en parafina en condiciones no optimas. Se seleccionaron 47 bloques en parafina que contenían biopsias de pleura, pulmón y pericardio correspondientes a 24 pacientes (66,66%hombres) mayores de 18 años, con inflamación granulomatosa crónica, remitidos al Departamento de Patología del Hospital Universitario del Valle entre 2002-2007. A cada muestra se le realizaron 10 cortes y se sometieron a dos métodos de extracción de ADN: 1.Convencional y 2.QIAamp-DNA mini kit®. La eficiencia del ADN fue valorada por espectrofotometría y amplificación del gen GAPDH. La concentración de ADN de las muestras extraídas por el método convencional fue de 65.52ng/µl ±11.47 (promedio±EE) y la relación 260/280 vario entre 0.52 y 2.30. De las muestras extraídas por el método comercial, la concentración media de ADN fue 60.89ng/µl±6.02, con una absorbancia que oscilo entre 0 y 2.64. El ADN obtenido fue sometido a PCR, de 47 muestras extraídas por ambos métodos, 25 y 23 respectivamente amplificarón exitosamente el gen GAPDH. Los métodos usados para la obtención de ADN presentaron un desempeño similar, revelando así su potencial utilidad en estudios retrospectivos a partir de biopsias embebidas en parafina en condiciones inadecuadas.

Tipo de documento:Artículo - Article
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Palabras clave:Medicina, microbiologia, histologia, patologia, biopsia, granuloma, ácidos nucleicos, fragmentación del ADN, reacción en cadena de la polimerasa
Unidad administrativa:Revistas electrónicas UN > Acta Biológica Colombiana
Código ID:22283
Enviado por : Dirección Nacional de Bibliotecas STECNICO
Enviado el día :27 Junio 2014 13:22
Ultima modificación:06 Junio 2018 10:54
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