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Transformación enzimática del 2, 4, 6-Trinitrotolueno en las cepas T30A y T30B

Rodríguez Merchán, Karol Elizabeth (2014) Transformación enzimática del 2, 4, 6-Trinitrotolueno en las cepas T30A y T30B. Maestría thesis, Universidad Nacional de Colombia.

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Resumen

Se estudio la transformación enzimática del TNT en las cepas Stenotrophomonas sp. T30A y Rhizobium sp. T30B. Con este fin, a partir de los extractos de proteínas de las cepas T30A y T30B, se evalúo la actividad TNT-reductasa, identificándose al NADPH como el donador de electrones. Esta actividad se observó principalmente en la fracción citoplasmática. Así mismo, al evaluar los extractos crudos obtenidos a partir de los cultivos en medio con y sin TNT, se determinó que las enzimas implicadas en la degradación no dependen de la presencia del explosivo para su expresión. En estos ensayos se detectó la presencia de ADNT y se observó que por cada dos mM de TNT reducido se liberaba una mMl de NO2-. Tanto en la cepa Stenotrophomonas sp. T30A como en Rhizobium sp. T30B, se identificaron proteínas homólogas a la familia de proteínas de las OYE Tipo II. Los resultados obtenidos coinciden con la ruta metabólica descrita en las OYE tipo II, en la cual se producen diarilaminas y se libera una mol NO2-, gracias a la condensación de un compuesto dihidruro-Meisenheimer y un isómero hidroxilamino dinitrotolueno., Abstract. The aim of this work was to study the enzymatic transformation of TNT in strains of Stenotrophomonas sp. T30A and Rhizobium sp. T30B. The TNT-reductase activity was assessed using crude extracts from the strains T30A and T30B, the NADPH was identified as an electron donor in the enzymatic reaction. This activity was mainly observed in the cytoplasmic fraction. The crude extracts from cultures in medium with and without TNT, were assessed and it was determined that the enzymes involved in the degradation do not depend on the presence of the explosive for its expression. ADNT and NO2- were detected as byproducts of the TNT reduction. In the case of the NO2- release, one mM of nitrite was released for two mMl of TNT reduced. In Stenotrophomonas sp. T30A and Rhizobium sp. T30B, homologous proteins were identified as members of the OYE protein family Type II. The results obtained were consistent with the metabolic pathway described for OYE Type II, where the diarylamines formation and NO2- release occurs by condensation of a Meisenheimer TNT-dihydride complex and a hydroxylamine dinitrotoluene compounds.

Tipo de documento:Tesis/trabajos de grado - Thesis (Maestría)
Colaborador / Asesor:Arbeli, Ziv and Ospina Sánchez, Sonia Amparo
Información adicional:Magister en Ciencias Microbiología. Línea de Investigación: Microbiología Ambiental
Palabras clave:NADPH, TNT, “Old Yellow Enzyme” (OYE), Enzimas, Enzymes
Temática:5 Ciencias naturales y matemáticas / Science > 57 Ciencias de la vida; Biología / Life sciences; biology
Unidad administrativa:Sede Bogotá > Facultad de Ciencias > Posgrado Interfacultades en Microbiología
Código ID:39561
Enviado por : Universidad Nacional de Colombia Biblioteca Digital -1-Sede Bogotá
Enviado el día :30 Julio 2014 15:35
Ultima modificación:30 Julio 2014 15:35
Ultima modificación:30 Julio 2014 15:35
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