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Evaluación de los cambios en la expresión de proteínas de Hydractinia Symbiolongicarpus (Cnidaria: ydrozoa) asociados a la exposición a lodos de perforación petrolera

Páez Gutiérrez, Iván Aurelio (2014) Evaluación de los cambios en la expresión de proteínas de Hydractinia Symbiolongicarpus (Cnidaria: ydrozoa) asociados a la exposición a lodos de perforación petrolera. Maestría thesis, Universidad Nacional de Colombia.

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Resumen

En el proceso de exploración y explotación de hidrocarburos en plataformas marinas, los lodos de perforación petrolera (LDP) son usados para mantener la estabilidad de los pozos generados. Estos LDP están compuestos por diversos materiales que incluyen arcilla, barita, emulsificantes, aditivos y algunos iones metálicos. Aunque se ha demostrado que los LDP pueden disminuir la viabilidad y alterar la estructura poblacional de algunas comunidades marinas, sus efectos a nivel celular aún no han sido estudiados. En retrospectiva, uno de los factores que ha limitado el estudio toxicológico de los LDP en organismos marinos, es la falta de un modelo animal adecuado. En este trabajo, el hidrozoario marino Hydractinia symbiolongicarpus fue utilizado como modelo experimental para evaluar el efecto agudo de los LDP sobre la fisiología celular bajo una aproximación de proteómica comparativa. Colonias de H. symbiolongicarpus fueron expuestas a LDP y sus proteínas totales extraídas a diferentes tiempos post-exposición para ser comparadas mediante electroforesis diferencial en dos dimensiones (2D-DIGE). Treinta proteínas sobre-expresadas en los distintos tiempos post-exposición en comparación con el control sin exposición fueron subsecuentemente identificadas por espectrometría de masas e incluyeron proteínas del citoesqueleto, reguladoras, de metabolismo y de homeóstasis redox. La sobre-expresión de proteínas de esta última categoría como la Gluatatión S-transferasa, Peroxirredocina VI, Tiorredoxina, y proteínas 14-3-3 indica que la exposición aguda a LDP induce un estado de estrés oxidativo que activa mecanismos de respuesta dirigidos a restablecer la homeóstasis redox. Finalmente, algunos de los genes que codifican estas proteínas fueron analizados a través de PCR en tiempo real para evaluar su potencial uso como biomarcadores de toxicidad aguda por LDP., Abstract. In the process of oil and gas exploration and exploitation in marine platforms, the drilling fluids are used to maintain the stability of the wells. Those drilling fluids are composed by diverse materials, including clay, barite, emulsifier additives and metal ions. Although it has been shown that the drilling fluids can decrease the viability and alter the population structure of some marine communities, their effects at the cellular level have not been addressed yet. In retrospective, one of the factors that have limited the toxicological analysis of drilling fluids in marine organisms is the lack of a suitable animal model. In this work, the marine hydrozoan Hydractinia symbiolongicarpus was used to evaluate the acute effects of drilling fluid on the cellular physiology under a comparative proteomics approach. H. symbiolongicarpus colonies were exposed to drilling fluids and their total proteins extracted at different times post-exposure to be compared by two-dimensional differential gel electrophoresis (2D-DIGE). Thirty over-expressed proteins at the different times post-exposure in comparison to the untreated control were identified by mass spectrometry and included proteins from the cytoskeleton, regulatory proteins, proteins involved in metabolism and those participating in redox homeostasis. Overexpression of proteins from the latter category such as Glutathion S-transferase, Peroxyredoxin VI, Thioredoxin and 14-3-3 proteins, indicates that the acute exposition to drilling fluids induces an oxidative stress state which activates response mechanisms leading to the reestablishment of redox homeostasis. Finally, some of the genes encoding these proteins were analyzed with real time PCR to evaluate their potential as biomarkers for drilling fluid acute toxicity

Tipo de documento:Tesis/trabajos de grado - Thesis (Maestría)
Colaborador / Asesor:Cadavid Guitiérrez, Luis Fernando
Información adicional:Magister en Ciencias – Biología. Línea de Investigación: Genética
Palabras clave:Cnidaria, Hydractinia, Estrés oxidativo, Lodos de perforación petrolera, Oxidative stress, Drilling fluids
Temática:5 Ciencias naturales y matemáticas / Science > 57 Ciencias de la vida; Biología / Life sciences; biology
Unidad administrativa:Sede Bogotá > Facultad de Ciencias > Departamento de Biología
Código ID:46160
Enviado por : bdigital4_ bog
Enviado el día :20 Enero 2015 15:36
Ultima modificación:20 Enero 2015 15:36
Ultima modificación:20 Enero 2015 15:36
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