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Expresión exógena de telomerasa humana (hTERT) en células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo humano (A-MSC) como una estrategia para la obtención de líneas celulares

Alvarez Sanchez, Maikel Andres (2019) Expresión exógena de telomerasa humana (hTERT) en células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo humano (A-MSC) como una estrategia para la obtención de líneas celulares. Maestría thesis, Universidad Nacional de Colombia - Sede Bogotá.

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Resumen

Las células madre mesenquimales (MSCs) son células multipotenciales de tipo adulto localizadas en múltiples tejidos como el adiposo y la médula ósea. Se ha demostrado ampliamente su utilidad en la terapia celular y medicina regenerativa. Una de las alternativas más prometedoras en este campo es el uso de los factores paracrinos secretados por las células madre, conocidos como secretoma, los cuales estimulan la regeneración celular y la angiogénesis y disminuyen la inflamación y otros mecanismos como la apoptosis. Los cultivos primarios de las células mesenquimales se ven marcados principalmente por la limitada esperanza de vida, la variabilidad fenotípica dependiente del donante y de los métodos de obtención y cultivo, el desarrollo de senescencia después de 20 - 30 duplicaciones de la población y cambios en la expresión genética con disminución en la tasa de proliferación a medida que se aumentan los subcultivos, por lo que el secretoma obtenido a partir de estos puede presentar variabilidad e implica obtención constante de muestras y la renovación periódica del cultivo primario. Una estrategia para algunos de estos problemas es la generación de líneas celulares de las MSCs. En este trabajo se generó la expresión exógena de telomerasa humana (hTERT) a partir de una transducción lentiviral como estrategia para prolongar la esperanza de vida celular y establecer líneas celulares de A-MSC, sin embargo se observó que las células no logran inmortalizarse con este proceso y que adicional su ciclo celular se vio afectado por la expresión de hTERT, causando la detención de la proliferación incluso en pases tempranos, se propone entonces la utilización de oncogenes para la inmortalización que permitan la regulación del ciclo celular, para así mitigar el efecto deletéreo de la telomeasa en las células., Abstract: Mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotential adult cells located in multiple tissues such as adipose and bone marrow. Its utility in cell therapy and regenerative medicine has been widely demonstrated. One of the most promising alternatives in this field is the use of paracrine factors secreted by stem cells, known as secretome, which stimulate cell regeneration, angiogenesis and decrease inflammation and other mechanisms of the body such as apoptosis. Primary cultures of mesenchymal cells are delimited mainly by limited lifespan, donor-dependent phenotype variability, development of senescence after 20-30 population doublings and changes in gene expression with decrease in the rate of proliferation as the subcultures are increased, so that the secretoma obtained can present variability and involve constant collection of samples and periodic renewal of the primary culture. An used strategy for solve these troubles is the generation of cell lines of A-MSCs. In this research an exogenous expression of human telomerase (hTERT) was generated from a lentiviral transduction as a strategy to prolong the cellular lifespan and establish cell lines, however it is seem that wasn’t possible to immortalize the cells with this process and that additional its cell cycle is affected by the expression of hTERT, causing the stop of proliferation even in early passages, then the use of oncogenes for immortalization is proposed, which allows regulation of the cell cycle, in order to mitigate the deleterious effect of telomerase in this cells.

Tipo de documento:Tesis/trabajos de grado - Thesis (Maestría)
Colaborador / Asesor:Chaparro Garzon, Orlando
Información adicional:Magíster en Fisiología. Línea de Investigación: Fisiología celular.
Palabras clave:Telomerasa humana, Células madre mesenquimales, Inmortalización, Líneas celulares, Transducción, Cell lines, Mesenchymal stem cells, Adipose tissue, Human telomerase
Temática:5 Ciencias naturales y matemáticas / Science > 57 Ciencias de la vida; Biología / Life sciences; biology
6 Tecnología (ciencias aplicadas) / Technology > 61 Ciencias médicas; Medicina / Medicine & health
Unidad administrativa:Sede Bogotá > Facultad de Medicina > Departamento de Ciencias Fisiológicas
Código ID:72478
Enviado por : Unnamed user with email maalvarezs@unal.edu.co
Enviado el día :04 Junio 2019 16:09
Ultima modificación:04 Junio 2019 16:43
Ultima modificación:04 Junio 2019 16:43
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